Veterinario Messico

Lingua: spagnolo / inglese
Riferimenti bibliografici: 23
Pagine: 85-93
PDF File: 343,83 Kb.

Riepilogo

Sommario

Durante gli ultimi 15 anni è stato dimostrato che l’elettroporazione rappresenta il metodo ideale per la trasfezione delle cellule di trunk di topo; Tuttavia, richiedono grandi quantità di DNA e cellule, oltre a attrezzature costose e delicate, questo rende questo processo costoso e laborioso. Lipohecy è un metodo di trasfezione che richiede meno cellule e DNA rispetto all’elettroporazione; Allo stesso modo, ha dimostrato di essere efficiente nel gran numero di linee cellulari. È stato dimostrato che dopo la lipogenazione di cellule del topo del topo, mantengono la loro pluripotenza e sono in grado di formare chimere a linea germinale e sono trasfettate in modo più efficiente rispetto all’elettroporio, ma nessuna mutagenesi diretta dalla lipofecondazione delle cellule del tronco. L’obiettivo del presente lavoro era di sapere se i lipofection possono essere utilizzati con la stessa o maggiore efficienza dell’elettroporazione per i protocolli di mutagenesi diretti regolari; In questo contesto, viene confrontata l’efficienza nella mutagenesi diretta tra queste tecniche nelle cellule del tronco del mouse E14TG2A, utilizzando un vettore di sostituzione. Tra le cellule transfettate non ci sono differenze di efficienza nella mutagenesi diretta tra gruppi; Tuttavia, i risultati che vengono offerti qui mostrano che i lipofection sono tre volte più efficienti nella trasfezione, che indica che la lipofezione è un metodo alternativo meno costoso per ottenere la mutagenesi diretta nel mouse delle cellule del tronco.

Riferimenti (in questo articolo)

  1. Thomas K, Capecchi R. Mutogenesi diretta del sito di Gene Targeting in cellule staminali derivate da embrione del mouse. Cella 1987; 51 (3): 503-512.

  2. Hasty P, Rivera-Perez j, Chang C, Bradley A. Frequenza target e modello di integrazione per l’inserimento e il vettore di sostituzione in cellule staminali embrionali. MOL cellulare Biol 1991; 11: 450-4517.

  3. Amura cr, Marek L, Winn Ra, Heasley Le. Neurogenesi inibita nelle cellule staminali embrionali carenti di JNK1. Moll biol 2005; 25: 10791-10802.

  4. bollag rj, waldman asso, liskay m. omologo ricombinazione in cellule mammiferi. Annu Rev Genet 1989; 23: 199-225.

  5. Tarek M. Membrana Electropolation: una simulazione di dinamiche molecolari. Biofisy J 2005; 88: 4045-4053.

  6. Capechi MR. Quanto sono vicine a implementare il targeting di geni negli animali diversi dal mouse. Proc Natl Acca SCI USA 2000; 97: 956-957.

  7. bugeon l, syed n, dalmman m j. un metodo veloce ed efficiente per la trasfezione transientemente è cellule: applicazione allo sviluppo di sistemi per condizionati Espressione genica. Transgenic res 2000; 9: 229-232.

  8. hasegawa s, hirashima n, nakanishi M. coinvolgimento microtuble nelle dinamiche interacergolari per la trasfezione genica mediare dal liposome cationico. Gene nel 2001; 8: 1669-1673.

  9. lakkaraju a, rahman e, dubinsky jm. La proteina correlata al ricevitore di lipoproteine di bassadity media la endocitosi dei liposomi anionici nei neuroni. J Biol Chem 2002; 277: 15085-15092.

  10. raviv u, needleman dj, li y, miller hp, wilson l, safinya cr. Complessi cationici liposome-microtubule: percorsi alla formazione di nanotubi proteici lipidici a due stati con estremità aperte o chiuse. Proc Natl Acad Sci USA 2005; 102: 11167-11172.

  11. hyun s, lee g, kim d, kim h, lee s, nam d et al. Produzione di suinetti derivati dal trasferimento nucleare con fibroblasti fetali porcini trasscimizzati con la proteina fluorescente verde migliorata. Biol Reprod 2003; 69: 1060-1068.

  12. mccreat k j, howcroft j, campbell kh, colman a, schnieke ae, tipo AJ. Produzione di pecore mirate del gene mediante trasferimento nucleare da cellule somatiche coltivate. Natura 2000; 29, 405: 1066-1069.

  13. lee jt, jaenisch r. un metodo per lipofezione di alta efficienza yac in cellule staminali embrionali murine. Acidi nucleici res 1996; 24: 5054-5056.

  14. ma h, liu q, diamond sl, pierce e A. Mouse Le cellule staminali embrionali del mouse lipoceato in modo efficace con la localizzazione nucleare il peptide comporta un alto rendimento di Topi chimerici e mantengono la potenza della trasmissione germinale. Metodi 2004; 33: 113-120.

  15. yang s, tatton s, pierce e, yoon k. Interferenze di RNA a doppio filamento specifico in cellule staminali embrionali del mouse indifferenziate. Moll biol 2001; 21: 7807-7816.

  16. dekker m, browers c, riele h.Modifica del gene mirata nelle cellule staminali embrionali carenti-carenti di mancata corrispondenza mediante DNA oligonucleotidi del DNA singolo. Acidi nucleici res 2003; 31: 27-34.

  17. vázquez jc, noguess c, rucker eb, pietrahita ja. Fattori che influenzano l’efficienza di introdurre precisi cambiamenti genetici nelle cellule ES mediante ricombinazione omologa: tag-and-Exchange rispetto al sistema CRE-IOXP. Transgenic res 1998; 7: 181-193.

  18. joyner al. Gene che si rivolge ad un approccio pratico. In: Rickwood D, Hames D, Editors. La serie di approccio pratica. TORONTO, CANADA: stampa Oirl., 1992: 85-97.

  19. hogan b, beddington r, costantini f, lacy E. Manipolazione del mouse embrione. Un manuale di laboratorio. Primavera fredda, nuovo sughero: laboratorio di laboratorio del porto di primavera fredda, 1994.

  20. hanson kd, sedivy jm. Analisi delle sezioni biologiche per il targeting del gene ad alta efficienza. MOL cellulare Biol 1995; 15: 45-51

  21. abe a, miyanohara a, friedmann T. migliorato il trasferimento genico con liposomi fusogenici contenenti glicoproteina di stomatite vescicolare g glicoproteina. J Virol 1998; 72: 6159-6163.

  22. grossini l, cournil-henrionnet c, mir lm, liagre B, dumas f, etiennes et al. Trasferimento del gene diretto in cartilagine articolare di ratto in vivo elettroporazione. FASEB J 2003; 17: 829-835.

  23. templeton ns, roberts dd, più sicuro B. Gene efficiente Targeting in cellule staminali embrionali del mouse. Terapia genica 1997; 4: 700-709.

r Igienico

Lascia un commento

Il tuo indirizzo email non sarà pubblicato. I campi obbligatori sono contrassegnati *